LH 20凝膠過濾層析介質(zhì)

貨號(hào)：LH0021

1. 產(chǎn)品簡介：

Chrom LH20由交聯(lián)Chrom G25葡聚糖珠制成,經(jīng)過羥丙基化以產(chǎn)生親水溶性和親脂性特征,在大多數(shù)水性混合物和極性有機(jī)溶劑中具有廣泛的穩(wěn)定性,是一種專為使用有機(jī)溶劑進(jìn)行天然產(chǎn)物純化而設(shè)計(jì)的填料。該填料可用于不同規(guī)模的分子物質(zhì)制備,主要應(yīng)用于自然產(chǎn)物(如類固醇、脂質(zhì)和低分子量肽)的制備級(jí)純化。        

2. 技術(shù)指標(biāo)：

3. 操作步驟：

LH 20可以在實(shí)驗(yàn)室被填裝到中壓層析柱中，以擴(kuò)大產(chǎn)量。將填料填裝到層析柱中,根據(jù)樣本量和填料載量選擇合適的層析柱和柱高。

備注:以柱高2000px 為例,一般推薦的流速約為30~2250px/h,柱高越大流速越慢。

3.1 緩沖液準(zhǔn)備

LH 20可以在各種水相或者有機(jī)相中運(yùn)行，根據(jù)被分離物種的性質(zhì)和分配層析的原理選擇流動(dòng)相，常選用乙酸乙酯、甲醇、水三種物質(zhì)的混合溶液，根據(jù)目的物的出峰時(shí)間調(diào)整流動(dòng)相中各物質(zhì)的比例。

3.2 樣品準(zhǔn)備

為了避免堵塞層析柱,樣品需要用0.45μm的微孔濾膜過濾。

3.3樣品純化

1)平衡：用平衡緩沖液沖洗層析柱，待出口的緩沖液的pH和電導(dǎo)與進(jìn)入層析柱之前的緩沖液一致即表示層析柱平衡完成，一般需要2~5CV。如果更換溶劑，應(yīng)注意介質(zhì)在新溶劑中的溶脹特性，并相應(yīng)地調(diào)整適配器調(diào)節(jié)桿的位置。

2)上樣：通過層析系統(tǒng)的上樣環(huán)等裝置將樣品加載到層析柱上，上樣的體積根據(jù)目的物和雜質(zhì)的分子大小不同或者分離方式不同有所不同，上樣體積通常按照柱體積的1%~2%進(jìn)行上樣。

3)洗脫：根據(jù)樣品組成情況設(shè)定洗脫流速(建議1~250px/h)進(jìn)行洗脫，流速越小分離效果越好。

4)再生：用平衡緩沖液清洗層析柱2~3個(gè)柱體積。

5)再平衡：用平衡緩沖液清洗，待pH和電導(dǎo)率與平衡緩沖液基本一致，就可以進(jìn)行第二次上樣。