貨號：T0042

儲存：室溫,避光,12個月

產品簡介:

在尿液樣本中加入蛋白沉淀劑和麗春紅 S，離心，蛋白質-染料復合物被沉淀下來，將沉淀物加入堿性溶液溶解后，分光光度法檢測 560nm 處吸光度，計算蛋白含量。Urine Protein Assay Kit(麗春紅比色法)主要用于定量檢測尿液中蛋白含量，較雙縮脲法靈敏，對白蛋白的敏感性比球蛋白要高。該試劑盒僅用于科研領域，不適用于臨床診斷或其他用途。

產品組成:

自備材料:

蒸餾水、離心管、試管、比色杯、分光光度計

操作步驟(僅供參考):

1. 取適量麗春紅 S試劑(10x)，按 1:9 加入蒸餾水，稀釋至 1x，室溫可保存 2~3個月。

2. 取 1ml蛋白標準配制液加入到蛋白標準(BSA)中，充分溶解后配制成 20mg/ml的蛋白標準溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白標準溶液應-20℃保存。

3. 取適量 20mg/ml 蛋白標準,稀釋至濃度分別為 0、200、400、600、800、1000、1200、1600ug/ml或所需濃度。特別提示：待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中；例如待測蛋白溶解于蔗糖中，亦取 20mg/ml蛋白標準溶解于蔗糖中，一般也可以用 0.9% NaCl或 PBS 作為溶解 BSA稀釋液。稀釋后的蛋白標準也應-20℃長期保存。

4. 制作蛋白標準曲線: 各取 100u 上述稀釋度的蛋白標準，與測定樣本操作相同(見第6步)。"0"號管空白調零，比色杯光徑25px，560nm 比色，制成標準曲線。

5. 半定量實驗:取3~5ml 新鮮尿液轉移入小試管，滴加磺基水楊酸溶液 3~4滴，形成界面，立即觀察，如有渾濁，提示尿液中含有蛋白質，渾濁深淺表示含量多少。

6. 取離心管，根據上述半定量實驗測得的蛋白濃度按下表要求加入待測樣本和蒸餾水，再加入 1ml 1x麗春紅S試劑，混勻，3500g 離心10min，將上清緩緩倒出后，倒置于濾紙上數分鐘，用濾紙條吸附管壁上多余的試劑(勿觸及管底沉淀)，再加入2ml Alkaline Buffer 至沉淀中，充分混合使沉淀溶解。

7. 分光光度計測定 560nm 波長處的吸光度，如無560nm，540~595nm 之間的波長也可，根據標準曲線計算出樣品的蛋白濃度

8. 參考區間: 46.5±18.1 mg/L

注意事項:

1. 蛋白標準(BSA)粉末溶解于蛋白標準配制液后，即獲得蛋白標準原液，該原液中含有防腐劑，不影響后續檢測，該蛋白標準原液-20℃長期保存。

2. 待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中，否則待測蛋白與蛋白標準中所含非蛋白成分不一致，有可能導致測定不準確。

3. 待測樣本蛋白含量<0.1g/L時，可用 1m!樣本加0.1m| 麗春紅S試劑(10x)，混勻，余下操作同上。

4. 該試劑盒也可以用酶標儀檢測。

5. 本法較為靈敏，較比濁法誤差小，膽hong素<4mg/L時對結果無影響，也不受室溫影響。為了加快 BCA 法測定蛋白濃度的速度可以適當用微波爐加熱，但是切勿過熱。室溫保存。蛋白標準配制成溶液后-20℃凍存。

6. 離心沉淀后上清液必須全部去除，但不損失沉淀物，否則可影響比色結果。為了加快BCA法測定蛋白濃度的速度可以適當用微波爐加熱，但是切勿過熱。室溫保存。蛋白標準配制成溶液后-20℃凍存。

7. 試劑開封后請盡快使用，以防影響后續實驗效果。